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一步法RT-qPCR因操作便捷、灵敏度高、特异性强等优势,在核酸检测领域得到广泛使用。逆转录(RT)酶,作为其关键组分,直接影响一步法核酸检测试剂的准确性和灵敏度。
在一步法反应中,基因特异性引物首先与待检测靶标匹配,并在逆转录酶的催化下合成******链cDNA。在这一过程中,错误的模板-引物匹配产生的非特异cDNA会在后续的PCR中被放大,从而出现非特异信号,导致结果误读。
新品介绍
优异的高低浓度均衡性
得益于温启动特性,Vazyme #RW201能够避免低温下(体系配置过程、PCR升温过程)非特异靶标的逆转录,减少dNTP、Mg2+等扩增原料的消耗,保证在低浓度模板情况下,仍能扩增特异性靶标,扩增平台期与高拷贝数模板一致。
图1.不同逆转录酶扩增线型情况
适配快速程序
Vazyme #RW201经过定向改造,能够以更快的速率合成cDNA,在PCR程序一致的情况下,2 min逆转录可达到和15 min逆转录同样的灵敏度。
图2.RW201在不同程序下的扩增情况
Vazyme #RWL201在完全保留了RW201性能同时,通过去除甘油,增加了冻干的可行性。
RWL201优异的稳定性
表1.RW201在冻融、温度存放下扩增情况
液氮冻融50次、4℃存放4 W、37℃存放30 d后,Vazyme #RWL201性能无显著变化。
性能展示-RL301
可抑制1 ng RNase A
图3.RL301耐受RNase A 情况
(RNA:1 μg;RI:40 U;20 μl反应体系)
在20 μl反应体系中,RL301能够抑制1 ng RNase A,RNA未发生明显降解。
更高的抗氧化活性
图4.RL301抗氧化情况
(RNA:1 μg;RI:40 U;RNase A:0.6 ng;20 μl反应体系)
RL301经过定向改造,提高了抗氧化能力,大大降低了对还原剂的依赖。
优异的存储稳定性与高温耐受性
图5:RL301稳定性情况
(RNA:1 μg;RI:40 U;RNase A:0.6 ng;20 μl反应体系)
RL301在37℃加压21天后,性能未发生显著变化。此外,RL301可耐受55℃ 2 h,更加适配于对温度要求较高的反应,如:RT-qPCR、RT-LAMP等。
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